بررسی گلیکوزیلاسیون آنتی ژن c-terminal msp1 (c-terminal merozoite surface protein) در پلاسمودیوم فالسیپاروم

پایان نامه
چکیده

مالاریا یکی از بیماری های مهم انگلی در کشورهای گرمسیری دنیا است. پلاسمودیوم فالسیپاروم انگل تک یاخته ای است که تب سه یک بدخیم را ایجاد می کند. آنتی ژن های پلاسمودیوم فالسیپاروم در سطح انگل یا در سطح سلول های آلوده ،کاندیداهای عمده جهت تولید واکسن می باشند، مانند: msp 1 و msp2 . کربوهیدرات های متصل به پروتئین های انگل مالاریا بعنوان اپی توپ های آنتی ژنیک مطرح بوده و بوسیله سیستم ایمنی میزبان تشخیص داده می شوند. بنابراین تصمیم به تخلیص آنتی ژنc-terminal msp1-19 و بررسی گلیکوزیلاسیون آن گرفته شد. انگل پلاسمودیوم فالسیپاروم در خارج از بدن میزبان و در شرایط in vitro با استفاده از روش trager and jensen کشت داده شد و با استفاده از روش raadfar میزان پارازیتمی تا 80% افزایش یافت. سپس سلول های انگل با بافر tkm مخلوط و اولترا سانتریفیوژ شدند. بدین ترتیب آنتی ژن های انگل پلاسمودیوم فالسیپاروم جدا و با روش sds-page الکتروفورز شدند.سپس با استفاده از ژل هایpreparative و روش الکتروالیوشن آنتی ژن مورد نظر تخلیص و با لوله های مخصوص تغلیظ شد، سپس الکتروفورز انجام شد و با رنگ آمیزی نیترات نقره رنگ و ایمونو بلاتینگ مورد بررسی قرار گرفت. آنتی ژن تخلیص شده بعد از رنگ آمیزی نیترات نقره و در روش ایمونوبلاتینگ تنها یک باند 19 کیلو دالتونی ایجاد نمود. بررسی گلیکوپروتئین ها با استفاده از کیت های qproteome o-glycan kit و qproteome total kit انجام شد و احتمال وجود گالاکتوز، n- استیل نورامینیک اسید (اسید سیالیک)، n- گالاکتوز آمین، گالاکتوز، n- گلوکز آمین، ساختارهای?- مانوزیدی شاخه دار و فرمهای هیبرید، پرمانوز در آنتی ژنc-terminal msp1-19 مشخص شد. تا کنون واکسنهای نوترکیب قادر به ایجاد ایمنی موثر و مطلوب نبوده و این امر ممکن است بدلیل عدم وجود گلیکوزیلاسیون مناسب باشد.

منابع مشابه

C-terminal polymorphism of Plasmodium falciparium merozoite surface protein-1 (MSP-1) from Tak Province, Thailand.

This study was undertaken to ascertain the extent of polymorphism in the C-terminal region of Plasmodium falciparum merozoite surface protein (MSP-1) from 119 malaria patients in Tak Province on the western border of Thailand, who were admitted to the Bangkok Hospital for Tropical Diseases, Faculty of Tropical Medicine, Mahidol University, Bangkok, Thailand. P. falciparum infection was confirme...

متن کامل

بررسی گلیکوزیلاسیون آنتی ژن (apical membrane antigen) ama1 در پلاسمودیوم فالسیپاروم

یک فرآیند مهم در چرخه زندگی پلاسمودیوم فالسیپاروم تهاجم به گلبولهای قرمز انسان است. ورود به سلولهای میزبان نیازمند آنتی ژن ama1 می باشد. بدلیل اینکه در یوکاریتوها آنتی بادیهایی که بر علیه این آنتی ژن ایجاد می شود می تواند مانع تهاجم شود بنابراین ama1 یکی از اهداف اولیه در تولید واکسن به شمار می رود. گفته می شود گلیکوزیلاسیون پروتئینهای سطحی در بسیاری از اعمال سلولی نظیر شناسایی سلولها سیگنالینگ...

15 صفحه اول

Automated C-Terminal Protein Sequence Analysis Using the HP G1009A C-Terminal Protein Sequencing System

Peptide and protein molecules are composed of amino acid molecules covalently coupled end-to-end through peptide bonds, resulting in linear sequences of the amino acid residues. These polypeptide molecules have two chemically distinguishable termini or ends, identified as the amino (N) terminus and the carboxy (C) terminus. The N-terminal and C-terminal amino acid residues define the ends of th...

متن کامل

Naturally acquired antibody responses to the C-terminal region of merozoite surface protein 1 of Plasmodium vivax in Korea.

We expressed a protein in Saccharomyces cerevisiae in order to evaluate the humoral immune responses to the C-terminal region of the merozoite surface protein 1 of Plasmodium vivax. This protein (Pv200(18)) had a molecular mass of 18 kDa and was reactive with the sera of individuals with patent vivax malaria on immunoblotting analysis. The levels of immunoglobulin M (IgM) and IgG antibodies aga...

متن کامل

The C-terminal domain of Plasmodium falciparum merozoite surface protein 3 self-assembles into alpha-helical coiled coil tetramer.

Proteins located on the surface of the pathogenic malaria parasite Plasmodium falciparum are objects of intensive studies due to their important role in the invasion of human cells and the accessibility to host antibodies thus making these proteins attractive vaccine candidates. One of these proteins, merozoite surface protein 3 (MSP3) represents a leading component among vaccine candidates; ho...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - دانشکده علوم پایه

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023